細胞三氣培養(yǎng)箱通過精準調控CO?、O?及N?濃度，為貼壁細胞、干細胞等提供接近體內生理條件的體外培養(yǎng)環(huán)境。其正確使用直接關系到實驗數據的可靠性與細胞培養(yǎng)成功率，以下從操作流程到維護保養(yǎng)進行系統性闡述：

　　一、使用前準備

　　1. 環(huán)境核查

　　確認設備放置于水平臺面，四周預留≥30cm散熱空間，遠離熱源與陽光直射；

　　檢查電源電壓是否匹配設備銘牌標注值，接地線需可靠連接；

　　啟用前進行空載運行測試，驗證溫控系統(設定37℃)與CO?控制系統的穩(wěn)定性。

　　2. 艙體預處理

　　新設備或長期停用后，需用75%乙醇擦拭內壁及托盤支架，紫外滅菌30分鐘；

　　預平衡氣體環(huán)境：關閉箱門后通入混合氣體(如95%空氣+5% CO?)，運行2小時使內部氣壓穩(wěn)定。

　　二、核心參數設置

　　1. 溫濕度管理

　　溫度設定：多數哺乳動物細胞適宜37±0.5℃，啟動后每小時記錄實際溫度；

　　濕度控制：保持95%±3%飽和濕度，每日添加無菌水至濕盤，避免冷凝水滴落。

　　三、操作規(guī)范

　　1. 樣品放入與取出

　　快速開閉門動作會導致箱內壓力驟變，應在1分鐘內完成存??；

　　培養(yǎng)瓶/皿需均勻分布于托盤，避免遮擋循環(huán)風口；

　　操作人員佩戴無菌手套，工具經酒精燈外焰滅菌。

　　2. 日常監(jiān)測

　　每日檢查顯示屏上的實時參數，重點觀察：

　　- CO?傳感器讀數與紅外檢測窗口一致性；

　　- 溫度波動曲線是否超出±0.3℃；

　　- 水箱水位線，及時補充滅菌注射用水。

　　四、維護與保養(yǎng)

　　1. 周期性維護

　　每周：清洗門封條縫隙處的污垢，測試報警功能(切斷電源模擬故障)；

　　每月：校準CO?紅外傳感器，更換進氣口HEPA濾芯；

　　每季度：排空加濕器水箱，用1%次氯酸鈉溶液消毒整個艙體。

　　2. 應急處理

　　超溫報警時立即切斷主電源，打開泄壓閥降低箱體壓力；

　　污染發(fā)生時停止實驗，將所有物品移出后執(zhí)行甲醛熏蒸消毒。

　　五、關鍵注意事項

　　禁止頻繁開關箱門，建議每天觀察次數≤3次；

　　不可疊放過多層搖床或重型設備，以免影響氣流分布；

　　長期不用時排空水箱，將濕度設置為0%，每月通電運行1小時防潮。

　　細胞三氣培養(yǎng)箱的精細化管理需要兼顧設備特性與生物學需求。通過規(guī)范的操作流程、嚴格的參數監(jiān)控和定期維護保養(yǎng)，可顯著提升細胞培養(yǎng)質量，為藥物篩選、組織工程等研究提供穩(wěn)定的實驗平臺。